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当前位置：北京百奥创新科技有限公司>>Qiagen>> 77144exoRNeasy Midi and Maxi Kits
exoRNeasy Midi and Maxi Kits
Cat. No. / ID: 77144
· 高纯度的总RNA(包括小RNA部分)来自外泌体和其他细胞外囊泡(ev)
· 只从外泌体中分离RNA，不包括非囊泡蛋白复合物中的RNA
· 方便的柱上程序可以在一小时内获取RNA
· Maxi试剂盒提供的高灵敏度，允许大样本输入量检测低丰度RNA
· 从大多数生物液体中分离，包括尿液、血清、血浆、脑脊液和细胞培养上清
Product Details
exoRNeasy Midi and Maxi Kits使用亲和性膜离心柱，有效地从大多数生物液体，包括尿液，血清，血浆，脑脊液和细胞培养上清中捕获外泌体和其他ev。然后，试剂盒使用经过验证的RNeasy MinElute自旋柱从ev中分离RNA。midi柱格式可以高效地处理较小的样本体积(最多1ml血清/血浆或4ml尿液)，而maxi柱格式允许使用大样本体积，最多4ml血清/血浆、16ml尿液或32ml细胞培养上清，以高置信度检测低丰度rna。结果是快速，一致和高度适合敏感的下游应用。
Performance
exoRNeasy纯化外泌体和其他细胞外囊泡的方案不仅比超离心更快，而且制备的制剂更干净。扫描电子显微镜显示，虽然这两种技术都能提供预期大小的完整囊泡，但超离心制备也包含许多较小的结构，它们与预期大小或形状不匹配。
此外，由Bioanalyzer分析，exoRNeasy和传统的超离心方法提供了类似的大小和产量大小的RNA。
最后，exoRNeasy在血浆中捕获所有无细胞mRNA，以及ev相关的miRNAs，这是通过RT-qPCR实验对使用exoRNeasy纯化的RNA和从exoEasy柱流出得到确认的。
Principle
exoRNeasy Midi and Maxi Kits改进了传统的超离心微囊分离方法，在短短20分钟内产生纯化的细胞外囊泡。使用Exosome Diagnostics公司开发的技术，试剂盒使用自旋柱格式和专门的缓冲液从预过滤的生物液体中捕获外泌体;使用Maxi试剂盒可达32毫升，使用MIDI试剂盒可达4毫升。然后使用QIAGEN miRNeasy技术提取总RNA。整个过程，从样本到RNA，只需要一个小时。
exoRNeasy血清/血浆启动试剂盒提供midi和maxi exoEasy柱，可在不同体积的预过滤生物液中进行分析。
Procedure
从细胞外微泡分离RNA的完整实验包括两步:纯化exosomes和分离RNA。
在exosomes纯化步骤，预过滤的而浆(不包含大干0.8uM的微粒)与Buffer XBP混合，加至exoEasav亲和性膜离心柱上。
结合到柱上。使用BufferXWP洗涤结合在膜上的囊泡，之后使用QIAzol裂解。
在RNA分离步骤，在QIAzol洗脱液中加入氯仿，回收水相，将其与乙醇混合。包括miRNA在内的总RNA结合到离心柱上，洗涤三次后洗脱。
Applications
exoRNeasy试剂盒非常适合从生物流体样品中发现的微囊中分离总RNA，包括mRNA和miRNA。
